Optimisation et construction de vecteurs d'expression
Le processus d’obtention d’un plasmide recombinant pour produire de l’ADN plasmidique en grande quantité, une protéine recombinante ou un vecteur de recombinaison ou de transfection peut s’avérer long et fastidieux.
Smaltis vous propose donc de prendre en charge la construction de vos vecteurs, quelle que soit l’application finale.
Pour cela, nous proposons un service personnalisé : design et synthèse de séquences, clonage, préparation de plasmides, construction de lignées cellulaires et contrôle d’expression.
– Applications à des systèmes procaryotes ou eucaryotes
– Contrôle qualité : PCR et séquençage Sanger
– Livrables : plasmides en solution ou lignées cellulaires
Service de clonage à façon réalisé étape par étape
– Le choix et design de la séquence d’intérêt
– L’optimisation de la séquence en fonction du cahier des charges
– Le choix de la méthode d’obtention de la séquence (PCR ou synthèse de gène)
– Le choix de la stratégie de clonage (restriction, Gateway, SLIC)
– Le choix du vecteur de clonage (ajout d’étiquette, co-expression ou non, choix de promoteurs, clonage en vecteur navette)
– Le contrôle du vecteur par restriction et séquençage
Exemples de réalisation
– Construction d’un vecteur d’inactivation génique bactérien
– Construction d’un vecteur de production des protéines Gag Pol et Env des virus endogènes HERV
– Construction d’un vecteur Broad-host-range pour la production de protéines recombinantes sécrétées chez des bacilles à Gram négatif
